MARCADORES
Gpc-B1
Este marcador se encuentra estrechamente ligado al gen Gpc-B1 (0.1 cM). El marcador detecta una deleción de 4 pb ligada al alelo que incrementa el contenido de proteína proveniente de Triticum turgidum ssp. dicoccoides (Distelfeld et al., 2006).
Los productos de PCR son visualizados en geles de acrilamida al 8% en buffer TBE 1X y teñidos con bromuro de etidio. Las flechas celestes marcan los fragmentos de 100 y 200 pb del marcador de peso molecular 100 pb (Biodynamics). Calle 1 producto de 126 pb perteneciente al alelo Gpc –, mientras que la calle 2 muestra el producto de 122 pb perteneciente al alelo Gpc + perteneciente a Triticum turgidum ssp. dicoccoides. En la calle 3 se muestra un individuo heterocigoto para el marcador Xuhw89.
Primers
UHW89-BF 5′- TCT CCA AGA GGG GAG AGA CA -3′
UHW89-R 5′- TTC CTC TAC CCA TGA ATC TAG CA -3′
Concentración final de productos utilizados en las reacciones de PCR:
1X Taq buffer (libre de Mg); dNTP: 200 µM c/u; MgCl2: 1.5 mM; primers: 0.2 µM c/u; Taq: 1 U; ADN genómico: 50-100 ng/reacción; Volumen final: 25 µl
Programa de PCR:
Desnaturalización: 94 °C, 5 min; Amplificación (40 ciclos); 94 °C 30 seg, 59 °C 30 seg, 72 °C 45 seg; Extensión: 72 °C 5 min.
Caracterización de la Variabilidad Genética presente en Variedades Argentinas de Trigo.
*Al momento no se observó variabilidad en el germoplasma local, o bien no hay variedades comerciales que posean el gen descrito.
Referencias
Distelfeld, A., Uauy, C., Fahima, T., & Dubcovsky, J. (2005). Physical map of the wheat high‐grain protein content gene Gpc‐B1 and development of a high‐throughput molecular marker. New Phytologist, 169(4), 753–763. https://doi.org/10.1111/j.1469-8137.2005.01627.x