MARCADORES
PinA-D1
Gautier et al. (1994) desarrollaron un marcador molecular dominante para este gen. El alelo PinA-D1a (Textura Blanda) está asociado a la amplificación de un fragmento de ADN de 330 pb mientras que el alelo PinA-D1b (Textura Dura) presenta ausencia de amplificación debido a una deleción del gen PinA-D1
Los productos de PCR son visualizados en geles de agarosa al 2% teñidos con bromuro de etidio. La flecha amarilla marca el fragmento de ADN de 330 pb perteneciente al alelo PinA-D1a (calles 3 y 4) mientras que la ausencia de banda (calles 1 y 2) señala la presencia del alelo PinA-D1b. La flecha azul señala el fragmento de 400 pb del marcador de peso molecular de 100 pb (Invitrogen)
Primers
Pina-D1-F: 5′- CCC TGT AGA GAC AAA GCT AA -3′
Pina-D1-R: 5′- TCA CCA GTA ATA GCC AAT AGT G -3′
Concentración final de productos utilizados en las reacciones de PCR:
1X Taq buffer (libre de Mg); dNTP: 200 µM c/u; MgCl2: 3.0 mM; primers: 0.2 µM c/u; Taq: 1 U; ADN genómico: 50-100 ng/reacción; Volumen final: 25 µl
Programa de PCR:
Desnaturalización: 94 °C, 4 min; Amplificación (40 ciclos); 94 °C 45 seg, 50 °C 45 seg, 72 °C 45 seg; Extensión: 72 °C 15 min
Caracterización de la Variabilidad Genética presente en Variedades Argentinas de Trigo.
a = alelo blando; b = alelo duro.
Aclaración: Los datos de la caracterización molecular aquí mostrados pueden contener variaciones según el origen de las semillas utilizadas, se recomienda utilizarlos de manera orientativa.
Referencias
Gautier, M.-F., Aleman, M.-E., Guirao, A., Marion, D., & Joudrier, P. (1994). Triticum aestivum puroindolines, two basic cystine-rich seed proteins: cDNA sequence analysis and developmental gene expression. Plant Molecular Biology, 25(1), 43–57. https://doi.org/10.1007/bf00024197