MARCADORES
Glu-B1al
El alelo Glu-B1al (Bx7oe+By 8*) presenta un importante efecto positivo en la calidad panadera. La presencia de este alelo resulta en un incremento en la expresión de la subunidad Bx7 debido a una duplicación funcional del gen que codifica para dicha subunidad.
Las variedades que presentan esta sobreexpresión tienen un mayor volumen en el test de sedimentación SDS respecto de cultivares que no presentan dicha sobreexpresión. Esta subunidad sobreexpresada adicionalmente incrementa la tenacidad del gluten y es considerada la razón por la cual el alelo Glu-B1al incrementa la calidad panadera (Butow et al., 2003; Vawser and Cornish, 2004).
En las variedades Argentinas de trigo hexaploide el alelo Glu-B1al (Bx7oe) se encuentra estrechamente relacionado con la categorización por grupos de calidad industrial, Grupo 1 corresponde a trigos correctores; Grupo 2 a trigos de panificación industrial y Grupo 3 a trigos de panificación directa (Pflüger et al., 2005).
En Argentina este alelo se encuentra fuertemente asociado a las variedades Grupo Calidad 1 (GC1) y frecuentemente en el germoplasma local (Vanzetti et al., 2013).
Marcador Molecular para el alelo Glu-B1al del locus Glu-B1:
Un marcador codominante fue desarrollado por Butow et al. (2004) para amplificar una región 750 pb corriente arriba de la región codificante de la subunidad Bx7oe. Las variedades que presentan esta subunidad producen un fragmento de 563 pb mientras que las variedades que presentan la subunidad normal Bx7 u otra subunidad amplifican un fragmento de 520 pb.
Los productos de PCR son visualizados en geles de agarosa al 2% y teñidos con bromuro de etidio. Las flechas celestes marcan el fragmento de 600 pb del marcador de peso molecular 100 pb (Invitrogen). Calles 1 y 3 producto de 540 pb perteneciente a la subunidad Bx7 mientras que las calles 2 y 4 producto de 563 pb perteneciente a la subunidad Bx7oe del alelo sobreexpresado Glu-B1al.
Primers
Forward 5′- CCT CAG CAT GCA AAC ATG CAG C -3′
Reverse 5′- CTG AAA CCT TTG GCC AGT CAT GTC -3′
Concentración final de productos utilizados en las reacciones de PCR:
1X Taq buffer (libre de Mg); dNTP: 200 µM c/u; MgCl2: 1.5 mM; primers: 0.2 µM c/u; Taq: 1 U; ADN genómico: 50-100 ng/reacción; Volumen final: 25 µl
Programa de PCR:
Desnaturalización: 94 °C, 5 min; Amplificación (40 ciclos); 94 °C 45 seg, 55 °C 45 seg, 72 °C 45 seg; Extensión: 72 °C 5 min
Caracterización de la Variabilidad Genética presente en Variedades Argentinas de Trigo.
Aclaración: Los datos de la caracterización molecular aquí mostrados pueden contener variaciones según el origen de las semillas utilizadas, se recomienda utilizarlos de manera orientativa.
Referencias
- Butow, B. J., Gale, K. R., Ikea, J., Juhász, A., Bedö, Z., Tamas, L., & Gianibelli, M. C. (2004). Dissemination of the highly expressed Bx7 glutenin subunit (Glu-B1al allele) in wheat as revealed by novel PCR markers and RP-HPLC. Theoretical and Applied Genetics, 109(7), 1525–1535. https://doi.org/10.1007/s00122-004-1776-8
- Butow, B. J., Ma, W., Gale, K. R., Cornish, G. B., Rampling, L., Larroque, O., Morell, M. K., & Békés, F. (2003). Molecular discrimination of Bx7 alleles demonstrates that a highly expressed high-molecular-weight glutenin allele has a major impact on wheat flour dough strength. Theoretical and Applied Genetics, 107(8), 1524–1532. https://doi.org/10.1007/s00122-003-1396-8
- Pflüger, L. A., Sestili, F., Plante, E., Margiotta, B., & Lafiandra, D. (27 de noviembre al 2 de diciembre de 2005). Biochemical and molecular characterisation of over-expressed HMW-G Subunit 7 [Resúmen de presentación de la conferencia]. 7th. International Wheat Conference, Mar del Plata, Argentina.
- Vanzetti, L. S., Yerkovich, N., Chialvo, E., Lombardo, L., Vaschetto, L., & Helguera, M. (2013). Genetic structure of Argentinean hexaploid wheat germplasm. Genetics and Molecular Biology, 36(3), 391–399. https://doi.org/10.1590/s1415-47572013000300014
Vawser, M-J., & Cornish, G. B. (2004). Over-expression of HMW glutenin subunit Glu-B1 7x in hexaploid wheat varieties (Triticum aestivum). Australian Journal of Agricultural Research, 55(5), 577. https://doi.org/10.1071/ar03227